Принцип метода
Активность кислой фосфатазы, присутствующей в образце, определяют модифицированным методом Хилмана.
альфа-нафтилфосфат + H2O → альфа-нафтол + фосфат
альфа-нафтол + FRTR-соль → окрашенное вещество
Тартрат используется в качестве специфического агента для простатической фракции кислой фосфатазы. Увеличение поглощения света при длине волны 405 nm (нм) пропорционально активности общей кислой фосфатазы в пробе. Поэтому ее активность может быть определена косвенно (через определение непростатической кислой фосфатазы) путем вычисления разницы между активностью общей и непростатической кислой фосфатазы.
Клиническое значение
Кислородная фосфатаза это фермент присутствует почти во всех тканях организма, особенно его концентрация высока в предстательной железе, желудке, печени, мышцах селезенки, эритроцитах и тромбоцитах. Высокий уровень кислой фосфатазы выявляют при патологиях простаты, таких как гипертрофия, простатит или рак; при гематологических заболеваниях, заболеваниях костей, печени, а также при заболевании Педжета или Гоше. Снижение активности кислой фосфатазы не имеет клинического значения.
Клинический диагноз не должен основываться на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.
Состав набора
- Реагент 1. Буфер: Цитрат рН натрия 5.2 - 50 mmol/l (ммоль/л).
- Реагент 2. Субстрат: Альфа-нафтилфосфат – 10 mmol/l (ммоль/л), FRTR – 6 mmol/l (ммоль/л).
- Реагент 3. Тартрат. Тартрат натрия – 2 ммоль/л (ммоль/л).
- Реагент 4. Уксусная кислота – 0.5 mol/l (моль/л).
- Инструкция по использованию.
- Сертификат качества.
Аналитические характеристики
- Линейность измерительного диапазона: 1 – 100 U/l (Ед/л). Отклонение от линейности не превышает 5%. Если полученные результаты были больше пределов линейности, разведите образцы 1:1 (в два раза) NaCl 9 g/l (г/л) и умножьте результат на два.
- Чувствительность не менее 1 U/l (Од/л).
- Коэффициент вариации результатов определений – не более 5%.
Материал для исследования
Сыворотка. Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов. Не используйте плазму. Кислородная фосфатаза очень лабильна при комнатной температуре. Необходимо как можно скорее тщательно отделить от форменных элементов и немедленно провести исследование.
Если сыворотка не исследуется сразу, стабилизируйте добавлением 50 µl (мкл) Р4 на 1 мл (мл) образца.
Стабильность: 7 d (сут) при 2-8 °C.
Перечень необходимого оборудования
- cпектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 405 nm (нм).
- подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
- общее лабораторное оборудование.
Подготовка реагентов
Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин).
Рабочий раствор: растворить 4 таблетки Р2 в одном флаконе Р1 буфера (1 таблетка Р2 рассчитана на 15 мл (мл) Р1 буфера). Аккуратно перемешать до полного растворения (около 30 мин (мин)). РР стабилен 2 d (сут) при 2-8 °С или 6 h (ч) при комнатной температуре. Р3 и Р4 готовы к использованию.
Условия измерения:
- длина волны 405 nm (нм) – кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
- постоянная температура 30/37 ºC
Референтные величины
Основываясь на результатах исследований, проведённых лабораториями, рекомендуем пользоваться нормами, приведенными ниже. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.
| 1 | 2 | 3 |
|---|---|---|
| 30 ºC | 37 ºC | |
| Кислородная фосфатаза общая: мужчины | < 4.3 U/l (Од/л) | < 5.4 U/l (Ед/л) |
| женщины | < 3.1 U/l (Од/л) | < 4.2 U/l (Ед/л) |
| Кислая фосфатаза простатическая | < 1.5 U/l (Ед/л) | < 1.7 U/l (Ед/л) |
Комплектация
| 1 | 2 | 3 |
|---|---|---|
| 1.024 | 1.025 | |
| Содержимое | 50 определ. | 100 определ. |
| Р1 | 1 х 60 мл (мл) | 1 х 105 мл (мл) |
| Р2 | 1 х 4 шт. | 1 х 7 шт. |
| Р3 | 1 х 1 мл (мл) | 1 х 1,5 мл (мл) |
| Р4 | 1 х 5 мл (мл) | 1 х 10 мл (мл) |