ИСПОЛЬЗОВАНИЕ
Диагностический набор для определения активности γ-глутамилтрансферазы, что используется как для ручного анализа (метод Sample Start и метод Reagent Start), да и в нескольких автоматических анализаторах. Реагенты должны использоваться только для диагностики in vitro квалифицированным лабораторным персоналом, только по назначению, соответствующих лабораторных условий
γ-глутамилтрансфераза (GGT, GGTP) является мембранным мембраном, что катализирует перенос глутамиловых групп из глутатиона на аминокислоты или пептиды. Большое количество GGT находится в органах внутренней секреции: почках, печени, желчных путях, поджелудочной железе. Несмотря на то, что наивысшая активность фермента находится в почках, повышены концентрации GGT в сыворотке чаще всего вызваны болезнями печени. В связи с тем, что алкоголь индуцирует синтез глутамилтрансферазы, определение уровня ее активности используется для мониторинга абстиненции у пациентов, лечащихся от алкоголизма.
ПРИНЦИП МЕТОДА
способ IFCC. Кинетический метод с L-γ-глутамил-3-карбокси-4-нитроанилидом. Скорость образования 5-амино-2-нитробензоата, которая измеряется колориметрически, прямо пропорциональна активности γ-глутамилтрансферазы.
Состав набора
- 1-GGT 5 х 24 мл
- 2-GGT 1 х 30 мл
Реагенты при температуре 2-8 °С сохраняют стабильность в течение всего срока годности, указанного на упаковке. Реагенты на борту аппарата при температуре 2-10 °C стабильны 12 недель. Подготовка и стабильность рабочего реагента Определение можно выполнить используя отдельные реактивы 1-GGT и 2- GGT или рабочий реагент. Для его приготовления необходимо осторожно смешать реагент 1-GGT и 2-GGT в соотношении 4+1. Избегать образования пены!
Стабильность рабочего реагента во тьме:
- 4 недели при 2-8 °C
- 5 дней при 15-25 °C
Концентрации в анализе
- Tрис (pH 8.25) 100 ммоль/л
- глицилглицин 100 ммоль/л
- L-γ-глютамил-3-карбокси-4-нитроанилида 4 ммоль/л
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
- автоматический анализатор или фотометр, позволяющий снимать показание при длине волны 405 нм;
- термостат на 25 ºC, 30 ºC или 37 ºC;
- общее лабораторное оборудование;
БИОЛОГИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ
Сыворотка, ЭДТК, плазма без следов гемолиза. Не использовать в качестве антикоагулянтов цитрат, оксалат и фториды, так как они угнетают активность GGT! Гепарин вызывает помутнение реакционной смеси! Активность GGT стабильна в образцах до 2 дней при 15-25 ºC или 1 неделя при 2-8 ºC или 1 месяц при -25 ºC. Замораживание образцов приводит к понижение ферментативной активности. Для возобновления активности необходимо выдержать образцы при комнатной температуре от 18 до 24 часов непосредственно перед анализом. Тем не менее, рекомендуется проводить исследования с использованием свежесобранного биологического материала