Гомоцистеин-СПЛ 10 опред

Принцип метода

Димеризированный гомоцистеин (окисленная форма) сводится к свободному гомоцистеину, реагирующему с серином, катализируемым цистатионин бета-синтетазой (CBS) с образованием цистатионина. Цистатионин, в свою очередь, разбивается цистатионин бета-лиазой (CBL) и формирует гомоцистеин, пируват и аммиак. Пируват превратится под действием лактатудегидрогеназы (ЛДГ) в лактат и NADH. Скорость превращения NADH в NAD+ прямо пропорциональна концентрации гомоцистеина.

Клиническое значение

Гомоцистеин – промежуточный продукт обмена незаменимой аминокислоты метионина. Один из факторов, повреждающий стенки сосудов и тем самым способствующий развитию атеросклероза наравне с нарушением липидного обмена. В норме в организме находится недолго и под влиянием ферментов превращается обратно в метионин или в цистотионин (следующий продукт обмена). Может скапливаться в организме вследствие разных нарушений. Гомоцистеин вызывает ряд патологических процессов, в частности, поражает эндотелий сосудов. На месте поражения с помощью холестерина, других липидов и кальция образуется атеросклеротическая бляшка, нарушающая кровообращение в органе. Повышение уровня гомоцистеина приводит к увеличению риска тромбообразования и атеросклеротического поражения сосудов на 80% у женщин и на 60% у мужчин.

Особый риск подвергаются пациенты с сахарным диабетом и молодые люди с признаками раннего атеросклероза, у которых могут развиться инфаркты и инсульты. Повышенное содержание гомоцистеина нередко приводит к нарушению маточного и плацентарного кровообращения, что может быть причиной бесплодия, рождение детей с нарушениями развития и невынашивания беременности. Развитие болезни Альцгеймера и мозговые расстройства в возрасте старше 60 лет напрямую связаны с повышенным содержанием гомоцистеина в крови.

Клинический диагноз не должен основываться на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.

Состав набора

1. Реагент 1. NADH – 0,47 mmol/l (ммоль/л), ЛДГ – 38 KU/L (кОд/л), серин – 0,76 mmol/l (ммоль/л), редуктант – 2,9 mmol/l (ммоль/л), натрия азид <1.
2. Реагент 2. Циклические энзимы: CBS - 0,748 KU/L (код/л) и CBL - 16,4 KU/L (код/л), натрия азид <1%.
3. Инструкция по использованию.
4. Сертификат качества.

Дополнительные реагенты

Калибраторы гомоцистеина (2 уровня) и контроли (3 уровня) поставляются отдельно.

Аналитические характеристики

1. Линейность измерительного диапазона: 1-46 µmol/l (мкмоль/л). Отклонение от линейности не превышает 5%. Если полученные результаты были больше, чем пределы линейности, разведите образцы калибратором «0» 1:2 (в три раза) или 1:9 (в 10 раз) и умножьте результат на 3 или 10 соответственно.
2. Чувствительность не менее 1 µmol/l (мкмоль/л).
3. Коэффициент вариации результатов определений – не более 5%.

Материал для исследования

Сыворотка или гепаринизированная или ЭДТА плазма крови. Тестируемые сыворотки или плазмы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови в течение часа. Если немедленное центрифугирование невозможно, собранные образцы крови должны храниться во льду и центрифугироваться в течение часа. Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов. Стабилен в течение 2 недель при температуре 2-8 С или в течение 8 месяцев при -20 С.

Перечень необходимого оборудования

• cпектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 340 nm (нм).
• Баня с термостатом и температурой 37 ºС
• подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
• общее лабораторное оборудование.

Подготовка реагентов

Перед использованием выдержать набор при комнатной температуре в течение 30 минут.

Все реагенты готовы к использованию.

Условия измерения:

• длина волны 340 nm (нм)
• кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
• температура 37 ºC

Референтные величины

Основываясь на результатах исследований, проведённых лабораториями, рекомендуем пользоваться нормами, приведенными ниже. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.

Нормальный уровень гомоцистеина для взрослых составляет 5-15 µmol/l (мкмоль/л), для взрослых старше 60 лет 5-20 µmol/l (мкмоль/л).

Комплектация